哺乳动物细胞蛋白表达
在过去二十年中, 重组蛋白(r-蛋白)在生物制药学领域的应用越来越广泛。多数应用在该领域的r-蛋白是需要翻译后修饰的,以获得与天然分子相同的生物活性。因此利用哺乳动物细胞制备高质量r-蛋白需要细胞自身具备蛋白折叠和翻译后修饰的功能。在实验过程中,若出现关键性蛋白折叠问题或E.coli在充裕的时间内无法表达蛋白或蛋白表达质量不高等问题时,客户可尝试使用哺乳动物表达服务,快速取得满意的结果。
一、哺乳动物细胞瞬时表达小试
服务内容:
1、公司合成基因(另外收费)或客户提供模板
2、构建表达载体
3、瞬时转染细胞
4、Westerm blot检测(特异性一抗需客户提供)
5、表达优化
6、如果目的蛋白有表达,从50ml细胞培养液中纯化目的蛋白
结果提交:
1、构建的表达载体及测序报告
2、50μg纯度>70%的融合蛋白
3、简单实验流程及结果
二、哺乳动物细胞稳定表达细胞株建立
服务内容:
1、公司合成基因(另外收费)或客户提供模板
2、构建表达载体
3、瞬时转染细胞
4、Western blot检测(特异性一抗需客户提供)
5、如果目的蛋白有表达,转染细胞后筛选稳定表达细胞株
结果提交:
1、构建的表达载体及测序报告
2、稳定表达细胞株
3、50μg纯度>70%的融合蛋白
4、SDS-PAGE结果
5、Western blot结果
6、简单实验流程及结果

