质粒载体构建
我们开展的分子克隆和亚克隆服务有:
1、载体改造包括载体MCS改造;启动子、增强子、筛选标志物等功能元件的改造;
2、以PCR为基础的各类载体构建,包括细菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体;报道基因载体构建;
3、基因片段克隆;
4、SiRNA载体构建与miRNA载体构建。
5、定点突变PCR。
服务要求:
1、请客户提供外源DNA序列及背景资料等电子版资料,包括载体名称、抗性、宿主菌、拷贝数等,并注明克隆使用的酶切位点;
2、如果所需克隆片段长于1.5kb,需要和客户沟通联系后再确认。
3、实验中使用氨苄、青霉素、卡那霉素、四环素以外的抗生素时,抗生素需您提供。
5、可用甘油菌和穿刺菌的形式邮寄菌体(最好同时提供相应质粒),如果提供质粒则质粒的量最好在4μg以上;如果提供的是PCR产物,则PCR产物量最好在5μg以上(最好附有电泳照片)。
结果提交:
1、实验所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份;
2、电泳图谱,测序图谱,酶切图。各一份;
3、含目的片段的质粒、含该质粒的细菌各一份;
4、对于基因片段克隆,由于是您提供的基因片段,我们只能保证酶切正确。一般情况下普通载体的克隆需10天左右时间。

