产品说明

3C-Protease为鼻病毒14型的3C蛋白酶的原核表达产物。这种蛋白酶特异识别短肽Leu-Phe-Gln/Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割，底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。该酶与PreScission Protease相同，在目标蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白（GST）之间由于含有蛋白酶特异识别短肽Leu- Phe-Gln/ Gly- Pro，所以能切割插入到PGEX-6P-1、PGEX-6P-2、PGEX-6P-3等带有酶底物识别多肽序列的融合蛋白，把GST和目标蛋白切开。在切割反应过程中，建议先用不同的切割时间摸索最佳条件，用SDS-PAGE电泳来评估切割程度，完全消化GST融合蛋白3C-Protease的用量，温度和温浴的时间要根据不同的目标蛋白而进行改变，应该在实验过程中优化切割条件。

产品用途

特异识别短肽Leu-Phe-Gln/Gly- Pro 切割插入到PGEX-6P-1、PGEX-6P-2、PGEX-6P-3等带有酶底物识别多肽序列的融合蛋白，把GST和目标蛋白切开。

使用注意事项

在切割蛋白时，每切割100?g蛋白需要1U 3C-Protease。在纯化蛋白时，往往每次需要切割10mg以下量的融合蛋白，需要100单位的酶，使用时应注意。

活性定义

在切割缓冲液(50mM Tris-HCL, 150mM NaCL，1mM EDTA, 1mM DTT，PH7.0 25℃)中切割100?g被检测的融合蛋白，反应条件为5℃ 16小时,切割率≥90%,定义为一个单位。