产品说明

该酶在75℃时可进行DNA复制，Pfu DNA聚合酶在镁存在的条件下可催化核苷酸沿5’→ 3’方向发生聚合反应，形成双链DNA，Pfu DNA聚合酶具有3’→ 5’外切酶校正活性。当聚合反应发生碱基错配时，聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。在所有热稳定性聚合酶中Pfu DNA聚合酶的错误几率最低，错误率约为1×10-6/每碱基对 ，缺点是PCR扩增灵敏度较Taq 低。建议Pfu DNA聚合酶用于要求保真度比较高的PCR反应，引物的延伸反应以及其它的一些应用，包括克隆、DNA表达、突变分析等。Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平端，无末端磷酸化。若要进行“T-A”克隆，可在PCR反应完了之后，加入Taq DNA聚合酶，于72℃反应1-2小时，以便在DNA 3’端附加一个“A”。

产品起源

为重组E. coli菌株，其基因组中含有来源于Pyrococcus furiosus的Pfu DNA polymerase基因。

产品内容

质量保证

本品经PCR验证，活性测定，内切核酸酶/缺刻酶测定和SDS-PAGE纯度鉴定。保证产品的质量稳定可靠。

活性定义

在75℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

产品用途

1. 基因亚克隆的PCR扩增。

2. 蛋白质表达载体的构建。

3. 突变体的制备 。