易错PCR试剂盒
产品说明
易错PCR(error-prone PCR)是指在扩增目的基因的同时引入碱基错配,导致目的基因随机突变。在待进化酶基因的PCR扩增反应中,利用Taq DNA多聚酶不具有3′→5′校对功能的特性,配合适当条件,以很低的比率向目的基因中随机引入突变,构建突变库,凭借定向的选择方法,选出所需性质的优化酶(或蛋白质),从而排除其他突变体。然而,经一次突变的基因很难获得满意的结果,由此发展出连续易错PCR(sequential error-prone PCR )策略,即将一次PCR扩增得到的有用突变基因作为下一次PCR扩增的模板,连续反复地进行随机诱变,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。 本公司生产的易错PCR试剂盒为广大的研究工作者提供了操作方便的体外进化基因操作方法,尤其在酶学研究领域显示出了它的优越性。使用时只要合成带有双酶切位点的两条引物,用本试剂盒提供的PCR缓冲液和Taq DNA Polymerase进行基因扩增,扩增产物用双酶切,连接到表达载体中,构建文库,再转化入表达宿主中,就能进行酶活力筛选。
产品内容
产品特点
1.提供了操作方便的体外进化基因操作方法,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2.简单、方便和使用,其基因错配率较稳定,一般1000bp可出现20个左右的随机点突变。
3.若把第一次优化的基因再行易错PCR基因突变,便可能获得最理想的酶活力工程菌株。
活性定义
在37℃条件下,30分钟内能使10 nmol 的dNTP渗入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
产品用途
1.筛选出高活性的酶工程菌珠。
2.研究突变对蛋白功能的影响。
3.在生物制药中用于延长半衰期突变体蛋白筛选。
产品编号
规 格
价 格(元)
LGEPP001
50次
500