病毒单一复制原点在限制性复制中的作用
日期:2009-09-22 15:35:55
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病毒单一复制原点在限制性复制中的作用 人乳头瘤病毒在病毒感染的起始阶段与 EB 病毒潜伏感染早期相似。闭环式基因组大量扩增,每个细胞的拷贝数达到 100 个左右,然后病毒进入维...
不同病毒复制原点在限制性复制中的作用
日期:2009-09-22 15:33:59
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不同病毒复制原点在限制性复制中的作用 EB 病毒潜伏感染时 , 其基因组以稳定的闭环式附加体形式存在于受染细胞中。此时 EB 病毒进入 B 细胞先进行几轮 DNA 复制,使病毒附加体数达到...
蛋白质裂解液的选择
日期:2009-09-18 13:58:11
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蛋白质的定位与蛋白质裂解液的选择: 全细胞:NP-40或RIPA 细胞质(可溶):Tris-HCl 细胞质(细胞骨架):Tris-Triton 细胞膜:NP-40或RIPA 细胞核:RIPA 线粒体:RIPA...
目的基因的获得
日期:2009-09-18 11:23:39
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限制酶法获取目的基因的优缺点:(1)可能获得完整的基因。包括内含子:调控区段和起始、终止区。(2)理论上可以获取生物的全部基因,构建基因文库。(3)目的基因的筛选、鉴定难度较大。(4...
基因组DNA的提取
日期:2009-09-18 10:21:35
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基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分...
质粒的提取
日期:2009-09-18 10:19:43
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质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用。质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。 质粒的提取方法很多,大多包括3个主要步骤:细菌...
质粒的制备
日期:2009-09-18 10:17:59
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质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用。质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。 质粒的提取方法很多,大多包括3个主要步骤:细菌...
DNA的连接
日期:2009-09-18 09:38:10
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DNA酶切片段的联接是两DNA片段相邻的5‘磷酸和3’羟基间可有连接酶催化形成磷酸二酯键,这个连接反应在体外一般都有大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶催化,但是分子生物学试验中主要采用T...
定量PCR全解析
日期:2009-09-18 09:25:13
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所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 ...
RT-PCR的原理及方法
日期:2009-09-18 09:21:39
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步骤: 1.抽提总RNA 2.反转录获得cDNA 3.以cDNA为模板做PCR ...
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